尼帕病毒

     NVD是1997年在马来西亚森美兰州双溪尼帕新城（Perak州Nipah城），首次发现的一种严重危害家畜、家禽和人类的新病毒性传染病      1998年10月至1999年5月期间，NVD在马来西亚猪群和人群中大规模爆发流行，致使265名养猪工人发病，105人死亡，116头猪被捕杀，随后本病又秧及到新加坡      自2000年2月以来，此病再度在马来西亚流行，引起该国和周边国家的恐慌和广泛关注      1      1 理化特性通过负染技术可知尼帕病毒是多型的，病毒颗粒大小为120～500nm，由包膜及丝状的核衣壳组成，核衣壳直径19±2nm，螺距5±0      4nm，包膜膜突长度17±1nm      包膜含有两个转膜蛋白：细胞受体结合蛋白（G：糖蛋白；H：血细胞凝集素；HN：血细胞凝集素/神经氨酸酶），和一个分开的融合蛋白      该病毒体外相当不稳定，对热和消毒药物抵抗力不强，加热56℃，30min即被破坏，用肥皂等清洁剂和一般消毒剂很容易灭活      该病毒在vero      BHK、PS细胞系中生长良好      1      2 分子生物学特性分别来自喉分泌物及脑脊液的马来西亚分离株，其全基因组序列已测出，基因组全长18246bp，其基因组结构见图1      它比亨德拉病毒（Hendrvirus，HV）多12个核苷酸，二者核苷酸一致性达70%～78%      这一相似性充分说明了二者紧密相关，但又是不同的病毒（图略）      图1：Npsh病毒的合团组结构NV基因组是由六个转录单位及3’和5’端的非翻译区所组成      六个转录单位为N、P、M、F、G      L，它们分别翻译为核衣壳蛋白（nucleocapidpro-tein）、磷蛋白（phosphoprotein）、膜蛋白（matrixpro-tein）、融合蛋白（fusionprotein）、糖蛋白（glycopro-tein）、大蛋白（largeprotein）      其中P基因由于内部翻译启动位点、重叠阅读框架和特殊的转录过程，可产生不同的多肽产物，如P蛋白、V蛋白、C蛋白      3’引导序列，含有转录正链mRNA所需的启动子      5’端含有病毒复制、合成负链RNA所需的启动子      3’和5’基因末端的前12个核苷酸高度保守并互补，NV这种结构同HV具有很高的一致性      表1显示了NV基因长度及同HV的比较      NV各个基因的启动基因、终止基因及连接基因都已经分析清楚，对研究NV分类学具有重要的作用，说明NV是一新型病毒      NV具有广泛的宿主范围，如猪、人、猫、犬、表INipah病毒基因长度及同Hendra病毒的比较基因病毒氨基酸长度（mm）开放阅读框架5’非翻译区3’非翻译区一致性（%）核苷酸一致性（%）一致性（%）核苷酸一致性（%）一致性（%）核苷酸一致性（%）NHendraNipah53253292      178      4575766      756841      1PHendraNipah70770967      670      510510541      946946940      9VHendraNipah545181      188      5CHendraNipah16616683      285      0MHendraNipah35235289      077      110010040      020020040      0FHendraNipah54654688      174      227228444      141841241      4GHendraNipah60460283      370      823323343      851650445      6LHendraNipah2244224486      873      015315354      0676758      2马、蝙蝠等      对马来西亚300个蝙蝠的病毒分离株进行RT－PCR分析，都没有证明蝙蝠是NV的贮存库      因此，最早引起此病爆发的NV的宿主来源，依旧是一难题      病毒在猪的扁桃体、呼吸道上皮组织和呼吸道受感染细胞碎片中繁殖，并通过咽喉部和气管分泌物传播的可能性较大      也有报道分析，脑炎及肺水肿，限制了病毒的传播，外排途径可能是通过泌尿系统，或与有病毒感染的体液接触      同一猪场内传播也可能是直接接触病猪的尿      体液、气管分泌物等而引起，此外也可能是通过使用同一针头及人工授精器械等方式传播      在尼帕病毒感染人的途径中，猪起了关键的作用      病人主要是通过伤口与感染猪的分泌液、排泄物及呼出气体等接触而感染      本病临床症状为：发热、严重头痛、肌痛、脑脊膜炎      猪感染本病的潜伏期大约为7～14天      不同年龄的猪临床症状有所不同      一般表现为神经症状和呼吸道症状，且发病率高，死亡率低      断奶仔猪和肉猪，高烧、呼吸困难伴有轻度或严重的咳嗽，呼吸音粗厉，严重的病例可见咳血      怀孕母猪症状更明显，肺炎，流出脓性分泌物，甚至流产，同时由于严重呼吸困难，局部肌肉痉挛，麻痹而亡      人感染后，潜伏期大约为1～3周，颈、腹部痉挛是与其它脑炎病毒相区别的具有诊断意义的症状      开始发热、头痛，随后出现嗜睡和定向力障碍      在24～48小时后可进一步发展为昏迷，三分之一病人会在昏睡中死亡，耐过昏迷的患者出现永久性脑损伤      少数病人有呼吸道症状，部分病人伴有高血压和心动过速      利用免疫组织化学技术对此病的致病机理及传染性进行研究发现，此病毒主要具有嗜内皮向性和嗜神经向性，另外还具有嗜气管、支气管向性及嗜膜间质和外膜向性      此病毒嗜血管内皮细胞，导致水肿，引起间质性肺炎（肺水肿）、脑脊膜炎、肾小球萎缩及胎盘感染      随着病程延长，内皮细胞发展为多核巨细胞，临床表现为急性呼吸道疾病，明显的神经系统疾病      病毒嗜膜间质和外膜向性，导致血管疾病，但没有明显的临床特征      嗜神经向性，病毒核衣壳集中在神经胶质细胞中、大脑皮质、脑干中，并延伸至实质组织，呈现弥散性血管炎，并伴有广大区域稀疏坏死，从而引起严重的神经系统疾病      广泛的血管炎表现，大部分内皮损伤贯穿于脑皮质和皮下，脑脊液中病毒复制活跃，这三者与死亡率增高有关      病毒分离是最重要、最基本的诊断方法，对于一新型病例，分离病毒是最理想的      病毒分离株的进一步鉴定，还需做电镜或免疫电镜、特异性抗血清中和实验、PCR等严格的质量控制实验      免疫组织化学抗兔抗鼠多聚葡聚糖连接的碱性磷酸酶，取代了生物素一亲和素过氧化物酶的检测系统，经济、方便      免疫电镜技术：尽管繁琐，但对研究致病机理      病理变化是最合适的      血清中和试验：有报道血清可能引起细胞毒性，但对血清质量要求低，是可靠的实验方法      间接ELISA法检测IgG抗体：主要是特异性的问题      病毒抗原的纯化损失较大，现已发展了基因工程抗原，利用杆状病毒表达系统会成的重组G和M蛋白抗原，已用于实验中，但还没有用于日常诊断      此技术成功，不仅可解决抗原的用量，也可解决质量特异性问题      尽管ELISA的特异性大于95%，但也存在假阳性问题      虽然如此，ELISA仍可作为一个非常有效的筛选工具，用于日常监测      PCR技术：发展时间较短，但此技术应用范围非常广泛，任一基因区段皆可进行PCR技术检测，Nipah病毒N基因区域高度保守，在此区域设计引物，利用RT－PCR技术检测RNA，不易漏检      此方法灵敏度高，机体在免疫抗体产生之前或甚微时，即可检测到RNA病毒，及早发现问题，防患于未然      尼帕病毒病发生后，封锁感染猪场，捕杀病猪和疑似感染猪及同群猪，加以深埋处理，烧毁猪舍，并对感染猪场进行全面彻底的消毒，以消灭或减少传染源      同时禁止疫区猪只向外转运，以防止疫情的蔓延；并对猪、马等易感动物，以及养猪从业人员和与猪密切接触的人员，进行紧急免疫接种      除按常规脑炎治疗外，抗病毒药Ribavirin正在试用中      广泛灭蚊，清除积水，以消灭蚊子滋生地，也是防止病原传播的重要措施      注意日常管理，定期对猪进行检疫监测，防重于治，减少对于人和动物的危害      2023年9月13日，印度卫生部长曼达维亚证实，印度南部喀拉拉邦报告两例尼帕病毒死亡病例      当地时间2024年7月21日，印度喀拉拉邦一名14岁男孩因感染尼帕病毒而死亡      据印度媒体报道，当地时间2023年9月15日，印度喀拉拉邦报告6人感染尼帕病毒，有700多人正在接受观察      此前，印度卫生部长证实，喀拉拉邦报告2例尼帕病毒死亡病例      2024年7月20日，印度喀拉拉邦政府证实，该邦默勒布勒姆地区确诊一例尼帕病毒感染病例，感染者是一名14岁男孩，7月21日死亡